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開發Pluronic® F127/ Nichigo G-Polymer™ (G-Polymer)生物墨水應用於3D列印

為了解決冷凍切片oct的問題，作者張齡元 這樣論述：

摘要 iAbstract ii致謝 iv目錄 v表目錄 ix圖目錄 x第一章 1緒論 11.1皮膚簡介 11.2皮膚癒合階段 21.3淺層皮膚傷口治療方法 41.4深層皮膚傷口治療辦法 51.5微結構與細胞生長 81.6 3D列印 91.7 Nichigo G-Polymer™ (G-Polymer) 101.8 Pluronic® F-127 121.9表皮生長因子 121.10 2D與3D培養 13第二章 14研究動機與實驗目的 14第三章 17研究方法與實驗步驟

173.1材料製備及分析 183.1.1 Gel permeation chromatography(GPC)量測 183.1.2 Pluronic® F127/ Nichigo G-Polymer™材料的改質與製備 18 3.1.3黏度測試(Viscosity) 193.1.4 IR測量與分析 193.1.5 Pluronic® F‑127/ Nichigo G-Polymer™ (G-Polymer)的3D列印 193.2體外細胞培養 193.2.1細胞的培養與接種

203.2.2列印螺旋二十四面體(Gyroid)的體外培養 203.2.3細胞毒性檢測 203.3統計分析 213.4細胞行為分析 213.4.1冷凍包埋(Optimal Cutting Temperature Compound, OCT)及切片 213.4.2蘇木素-伊紅染色(Hematoxylin and eosin stain, H&E stain) 21第四章 22 實驗結果與討論 224.1材料製備與檢測 224.1.1 Nichi

go G-Polymer™ (G-Polymer)的GPC結果 224.2 2D體外細胞實驗 214.2.1 Polyvinyl alcohol (PVA)和Nichigo G-Polymer™ (G-Polymer)的生物相容性比較 224.2.2 Nichigo G-Polymer™ (G-Polymer)生物相容性檢測 234.3材料改質&探討 244.3.1材料的改質 244.3.2改質後材料Nichigo G-Polymer™ (G-Polymer)/Pluronic® F127黏度測試 274.3.3 Pluronic® F‑127/ Ni

chigo G-Polymer™ (G-Polymer)生物毒性檢測 284.3.4 20w% F127 + 5w% G-polymer物理交聯後IR光譜變化 294.3.5 20w% F127 + 5w% G-polymer化學交聯後IR光譜變化 314.4 3D體外細胞實驗 324.5蘇木素-伊紅染色(Hematoxylin and eosin stain, H&E stain)結果 33第五章 35結論 35第六章 37 未來工作 37第

七章 38參考文獻 38

人類汗腺組織中Matriptase、Prostasin與其抑制劑 HAI-1/2的表現與功能

為了解決冷凍切片oct的問題，作者郭姿佑 這樣論述：

當環境或體內溫度升高產熱，促使汗腺分泌汗液，容易引起溼疹或造成慢性發炎皮膚疾病患者刺痛與搔癢症狀更加嚴重。汗液與汗管中含有各種蛋白酶與其內生性抑制劑，汗腺導管中含有上皮鈉離子通道 (epithelial sodium channel, ENaC)，可回收鈉離子來調控皮膚的含水量。從先前研究已知prostasin可水解表皮鈉離子通道γ次單元的抑制胜肽，促使ENaC打開，而 prostasin又受 matriptase的水解而活化，並受到內生性抑制劑：第一型及第二型肝細胞生長因子活化酶抑制蛋白 (hepatocyte growth factor activator inhibitor 1/2,

HAl-1/2)的抑制。另外，異位性皮膚炎 (atopic dermatitis, AD)是一種會反覆發作的慢性發炎皮膚疾病，過去有研究提出汗液與異位性皮膚炎具關聯性。因此，本研究透過免疫組織化學染色觀察人類皮膚汗腺组織中prostasin、matriptase、HAI-1以及HAI-2的分佈，探討與ENaC之間的關係，並利用白血球介白素-4 (Interleukin-4, IL-4)、白血球介白素-13 (Interleukin -13, IL-13) 及 腫瘤壞死因子 (tumor necrosis factor-α, TNF-α) 誘導HaCaT細胞成為類異位性皮膚炎細胞模型，觀察在不同

鈉離子濃度下，蛋白酶與其內生性抑制劑表現量。本研究根據細胞型態及功能，將汗腺分成三大部分：出汗口、導管部以及分泌部。發現Total matriptase及HAI-1在汗腺導管部及分泌部都表現較強的訊號，觀察到些許活化態matriptase在分泌部；而prostasin會特別集中表在汗腺導管面向管腔之內側。在細胞實驗中，發現環境中鈉離子含量提高會使HaCaT細胞內胸腺基質淋巴生成素 (thymic stromal lymphopoietin, TSLP) 表現量增加，也發現不論在低或高鈉離子環境中，皆可以觀察到再加IL-4、IL-13及TNF-α後，prostasin、matriptase、HA

I-1與HAI-2的表現量皆改變。另外，透過細胞免疫螢光染色，發現將細胞於短時間培養於高鈉離子環境中，prostasin會逐漸從細胞核旁向細胞膜靠近。本論文中，我們發現環境中鈉離子含量高低及促發炎細胞因子，皆會影響細胞內蛋白質表現，表示汗液中的鈉離子與異位性皮膚炎的致病機制可能具有密切關係，但考慮到汗液組成複雜，未來可以進一步模擬汗液的培養環境，繼續觀察上述各種蛋白條件之變化。總體而言，環境中鈉離子濃度及細胞因子皆會影響蛋白酶與其內生性抑制劑的表現量，但其中詳細機制需要繼續探討。