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正好的民法選擇題(基礎篇)

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探討尼古丁在人類非小細胞肺癌細胞株 （A549） 中對細胞內酸鹼平衡機制的作用

為了解決玖 壹 壹 IG的問題，作者黃子庭 這樣論述：

目錄第一章 緒論.....................................................................1第一節、肺癌簡介與流行病學.......................................................1壹、肺癌簡介....................................................................1貳、流行病學....................................................................1參、

導致肺癌的危險因子...........................................................3第二節、菸草對於肺癌的影響.......................................................5壹、菸草之簡介..................................................................5貳、Nicotine之藥理學特性........................................................6參、Nicotinic ace

tylcholine receptors (nAChRs) 簡介............................8肆、nAChR非選擇性拮抗劑---Mecamylamine..........................................9伍、尼古丁及其受體nAChR在肺癌A549細胞中所扮演的作用..............................10第三節、細胞內酸鹼恆定之重要性..................................................13壹、細胞內酸鹼恆定之重要性.........................

.............................13貳、細胞內pH值之恆定...........................................................13參、被動緩衝能力 (Buffering power, β)..........................................14肆、主動調控蛋白 (active pHi regulators).......................................17伍、Na+ - H+ exchanger (NHE) 之簡介.....................

.......................18陸、Na+ - HCO3- exchanger (NBC) 之簡介.........................................23柒、Anion exchanger (AE) 之簡介................................................24捌、Cl- - OH- exchanger (CHE) 之簡介...........................................25玖、K+ - H+ exchanger (KHE) 之簡介..................

...........................25拾、monocarboxylate transporter (MCT) 之簡介...................................26第四節、癌症與細胞內pH值的關聯..................................................30壹、癌細胞特性.................................................................30貳、pH值之失衡在癌症中扮演的角色....................................

............40參、NHE與MCT在癌症中扮演的角色..................................................43第五節、研究目的...............................................................45第二章 材料與方法..............................................................46第一節、實驗儀器、藥品及試劑....................................................46壹、

儀器......................................................................46貳、藥品......................................................................47參、抗體......................................................................50第二節、實驗方法...............................................................51壹

、細胞培養...................................................................51貳、細胞給藥之組別.............................................................53參、顯微螢光技術 (Microspectrofluorimetry).....................................54肆、西方墨點法 (Western blot)..................................................61伍、海馬生物能

量代謝測定 (Glycolysis Stress Test)...............................67陸、流式細胞分析 (Flow cytometry)..............................................68柒、全自動細胞遷移行為紀錄系統 (Electric cell-substrate impedance sensing, ECISTM) ............................................................................70捌、統計方法...........

........................................................71第三章 結果....................................................................72第一節、Nicotine對A549細胞醣解能力之影響........................................72第二節、細胞內pH值校正.........................................................74第三節、給予nicotine對於A549細胞之pHi影

響.......................................75第四節、Nicotine對於A549細胞的NHE活性之影響.....................................75壹、A549細胞之NHE生理性證明....................................................75貳、A549細胞的NHE藥理性證明....................................................76參、急性給予nicotine對於A549細胞之NHE活性影響..................

.................77肆、慢性給予nicotine 8小時對A549細胞的NHE活性之影響..............................78伍、慢性給予nicotine 24小時對A549細胞的NHE活性之影響.............................78第五節、Nicotine對於A549細胞的MCT活性之影響.....................................79壹、A549細胞的MCT生理性證明....................................................79貳、A549細胞的M

CT藥理性證明....................................................80參、急性給予nicotine對於A549細胞之MCT活性影響...................................81肆、慢性給予nicotine 8小時對A549細胞的MCT活性之影響..............................81伍、慢性給予nicotine 24小時對A549細胞的MCT活性之影響.............................82第六節、Nicotine對A549細胞之主動運輸蛋白NHE、MCT1、MCT4及

HIF-1α表現量影響.........83第七節、Nicotine對A549細胞表面之主動運輸蛋白NHE、MCT1與MCT4表現量影響.............85第八節、Nicotine對A549細胞之遷移作用............................................87第四章 討論....................................................................88第一節、nAChR type.........................................................

...88第二節、細胞給藥模式...........................................................89第三節、A549細胞之醣解能力.....................................................93第四節、Nicotine對A549細胞之pHi變化............................................94第五節、A549細胞之NHE排酸機制..................................................95第六節、給予nicotin

e對於A549細胞之NHE活性影響...................................96第七節、給予nicotine對於A549細胞之MCT活性影響...................................98第八節、Nicotine對A549細胞之主動運輸蛋白NHE、MCT1、MCT4與HIF-1α表現量影響........100第九節、Nicotine對A549細胞表面之主動運輸蛋白NHE、MCT1與MCT4表現量影響............101第十節、Nicotine對A549細胞之遷移作用................................

...........101第十一節、本研究之臨床意義.....................................................102第五章 結論...................................................................106Table........................................................................107Figure.......................................................

................113第六章 參考資料...............................................................130附錄.........................................................................149 

來韓老師這裡學饒舌：有了這一本，讓你饒舌不走冤枉路!

為了解決玖 壹 壹 IG的問題，作者韓森,人人有功練 這樣論述：

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抗CEBPD蛋白雞源抗體之製備及定性

為了解決玖 壹 壹 IG的問題，作者陳靜萱 這樣論述：

CCAAT/增強子結合蛋白δ (CEBPD)為C/EBP家族的一員。先前研究發現，CEBPD在白介素6或脂多醣的刺激下，表現量會相較於正常生理狀態下高。此外，人類CEBPD已被證實可調控參發炎基因的表現，且與阿茲海默症及類風濕性關節炎有所相關。然而，目前市面上並無高特異性辨認CEBPD之抗體可用於治療或檢測CEBPD相關之疾病。有鑑於此，本次研究目的在於製備高特異性辨認CEBPD之抗體，並測試其和CEBPD之結合能力。我們首先利用大腸桿菌系統大量表現與純化CEBPD全長重組蛋白，並以CEBPD全長蛋白作為抗原免疫雞隻。我們也利用基因轉殖技術將CEBPD的四個片段基因接到pET-21a(+)載

體上。免疫後我們從雞蛋中純化出IgY多株抗體，利用西方墨點法和酵素免疫分析法證實IgY和CEBPD-FL重組蛋白有特異性的結合能力。接著我們犧牲雞隻取其脾臟利用噬菌體展示技術建構出大小分別為5.8 × 106短鏈和1.1 × 107長鏈的單鏈抗體基因庫。經過篩選後，噬菌體篩選酵素免疫分析法顯示出有特異性的抗體被放大出來。從定序分析我們共獲得五株不同的抗CEBPD 單鏈抗體，包含有S1、S4、L4、2L3和2L4。這五株單鏈抗體經表現及純化後，在西方墨點法和酵素免疫吸附法證實能辨認CEBPD全長重組蛋白。並在競爭型酵素免疫分析法推測出這五株單鏈抗體的解離常數約為10-6~10-7 M。這五株單鏈

抗體對CEBPD片段蛋白結合力並不理想，只有全長有反應，且在西方墨點法在目前的測試中無法辨識細胞裂解液裡的CEBPD蛋白。由上述結果得知，篩選出之能辨認CEBPD重組蛋白的單鏈抗體，雖然須進一步測試與細胞內生性CEBPD蛋白之結合能力，但我們相信這些抗體在未來是有潛力被應用於檢測CEBPD相關之疾病。