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金針菇與杏鮑菇子實體之萃取物對人類單核球細胞株形成泡沫細胞之影響

為了解決生活泡沫綠茶250ml的問題，作者簡嬈祺 這樣論述：

人類單核球細胞株 (THP-1) 藉由藥物分化為巨噬細胞後，常用於進行各種與發炎相關之實驗探討，但使用不同的藥劑、劑量和培養時間可能會造成細胞分化的程度不同。因此，實驗的第一部份首要探討Phorbol-12-myristate 13-acetate (PMA) 之適當培養濃度與培養時間，之後再探討金針菇 (Flammulina velutipes) 與杏鮑菇 (Pleurotus eryngii) 子實體之萃取物對分化後之THP-1巨噬細胞在動脈粥狀硬化相關因子之影響。 泡沫細胞形成與動脈粥狀硬化之發展有重要關係。因此，降低泡沫細胞形成已被認為具有改善動脈粥狀硬化發展之潛力。本實驗利用金針

菇與杏鮑菇子實體之水層和乙酸乙酯層萃取物培養分化之THP-1巨噬細胞，觀察萃取物對減緩泡沫細胞形成之能力，並探討是否與抑制巨噬細胞表面清除者接受器CD36表現或增加PPARα (Peroxisome proliferator-activated receptors α)、LXRα (Liver X receptors α) 和ABCA1 (ATP-binding cassette transporter A1)蛋白質表現有關。 由探討THP-1細胞分化條件之實驗結果顯示，以PMA誘導THP-1之合適培養濃度與時間為20 nM 48小時，於此條件培養下，細胞表面抗原CD14和CD36皆有顯著增

加的趨勢，可判斷細胞已分化為巨噬細胞。因此，在後續實驗中以20 nM PMA培養48小時作為分化THP-1為巨噬細胞的條件。MTT實驗結果顯示，分化之THP-1細胞以250 μg/mL金針菇乙酸乙酯層萃取物 (FEA)、200 μg/mL杏鮑菇乙酸乙酯層萃取物 (PEA)、900 μg/mL金針菇水層萃取物 (FW)和900 μg/mL杏鮑菇水層萃取物 (PW) 培養24小時，其存活率與控制組相比較無顯著差異。因此，在後續實驗中，以此四種樣品及其濃度測試對降低細胞中膽固醇濃度之影響，並探討膽固醇濃度降低是否與抑制CD36表現，或增加PPARα、LXRα和ABCA1蛋白質表現有關。油紅實驗結果顯

示，FW、PW、FEA和PEA皆可顯著降低分化之THP-1細胞吞噬氧化態低密度酯蛋白 (Oxidized modified low density lipoprotein, oxLDL)，其各別降低至88.12、88.23、87.50和85.43%。流式細胞儀偵測CD36表現量結果顯示，FW和PW會顯著增加CD36表現量，各別增加1.22和1.15倍，而FEA和PEA可顯著降低CD36表現量，各別降低0.75和0.88倍。西方墨點法結果顯示，FW、PW、FEA和PEA可增加分化之THP-1細胞表現PPARα和LXRα，而FW和FEA可增加ABCA1表現，PW和PEA則有降低ABCA1表現的趨勢

。 綜合上述實驗結果顯示，金針菇與杏鮑菇子實體之水層和乙酸乙酯層萃取物可改善分化之THP-1細胞吞噬oxLDL，降低泡沫細胞形成，其中，FW處理之細胞可能藉由膽固醇逆向運輸，增加ABCA1蛋白質表現，移除細胞中之膽固醇；PEA處理組則可能藉由抑制CD36表現量，減緩細胞吞噬oxLDL；而FEA可能藉由膽固醇逆向運輸和抑制CD36表現，移除細胞中之膽固醇，以達到減緩泡沫細胞之形成。