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椬梧甲醇萃取物鎮痛及抗發炎分子機轉之研究

為了解決Qn ig的問題，作者廖繼仁 這樣論述：

全世界胡頹子屬(Elaeagnus)的植物約有90種，台灣胡頹子屬之植物共有9 種。許多胡頹子屬的植物為民間藥用植物。椬梧(Elaeagnus oldhamii Maxim.)為傳統藥用植物。椬梧根部用於治療疼痛及發炎之症狀，如：跌打損傷、關節疼痛及類風濕性關節炎等。椬梧葉子用於治療肺部疾病，如：咳嗽、哮喘及肺膿瘍等。現今並無文獻針對椬梧鎮痛抗發炎之機轉加以探討。本次研究選擇以醋酸扭體試驗及福馬林舔足試驗評估椬梧葉子甲醇萃取物(EOMeOH)之鎮痛能力；以λ-角叉菜膠(λ-carrageenan)誘發小鼠足蹠浮腫試驗評估其抗發炎能力。為了進一步了解椬梧葉子甲醇萃取物之抗發炎機轉，我們於λ-角

叉菜膠誘導發炎5小時後，分析浮腫腳掌組織之IL-1?牷BIL-6、TNF-α、COX-2、 MDA、NO濃度及肝臟組織中之抗氧化酵素SOD、GSH-Px、GSH-Rd之濃度，藉以探討其抗發炎作用機制。 於鎮痛實驗之結果顯示，椬梧葉子甲醇萃取物可以減少醋酸扭體實驗中，小鼠的扭體次數；及減少福馬林舔足實驗後期，小鼠的舔足時間。於抗發炎實驗結果顯示，椬梧葉子甲醇萃取物可以減少λ-角叉菜膠實驗中第2、3、4、5小時，小鼠腳掌的浮腫程度。另外，於λ-角叉菜膠誘導發炎5小時後，椬梧葉子甲醇萃取物對λ-角叉菜膠誘導浮腫腳掌組織IL-1?牷BIL-6、TNF-α、COX-2、MDA、NO皆有不同程度之抑

制；並可提升肝臟組織中抗氧化酵素SOD、GSH-Px之活性。實驗結果顯示，椬梧葉子甲醇萃取物之抗發炎機轉可能經過兩條路徑：第一條路徑為降低足蹠發炎組織中之發炎介質IL-1?牷BIL-6、TNF-α、COX-2之含量；第二條路徑為增加肝臟之抗氧化酵素SOD、GSH-Px，降低足蹠發炎組織中NO及脂質過氧化物MDA之形成。 本研究中，我們評估椬梧葉子之甲醇及不同分劃層萃取物體外抗氧化能力。在體外抗氧化活性評估中，以DPPH (1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl)自由基清除、TEAC (trolox equivalent antioxidant capacity)、F

RAP (ferric reducing antioxidant power)、總還原力，總多酚含量及總黃酮含量測定評價椬梧葉子甲醇及不同分劃層萃取物之體外抗氧化能力。實驗結果顯示椬梧葉子之甲醇萃取物具有不錯之體外抗氧化活性，且含有豐富之多酚及黃酮含量。椬梧之成分研究尚無文獻記載。故進行椬梧葉子的成分分離，於椬梧葉子的乙酸乙酯分劃層中分離得25個化合物，為三萜類化合物13個(化合物1-13)、黃酮類化合物5個(化合物14-18)、木脂素類化合物1個(化合物19)、芳香環類化合物6個(化合物20-25)。另外，以LPS (lipopolysaccharide)誘導RAW264.7細胞株發炎之實驗

，評價此25個化合物之體外抗發炎能力；以人類非小細胞癌A549細胞株之MTT試驗，評價此25個化合物對於肺癌細胞之細胞毒殺能力。實驗結果顯示，化合物17、18、19有不錯的體外抗發炎能力，抑制由LPS誘導產生NO之IC50 (The half maximal inhibitory concentration)皆小於20 μg/mL。另外，化合物2、4、6、8、18有不錯的細胞毒殺能力，抑制人類非小細胞癌A549細胞株之CC50 (The half maximal cytotoxic concentration)皆小於20 μg/mL。HPLC分析是一種常見應用於藥材品質管制的方法。基於熊果酸(

ursolic acid)及齊墩果酸(oleanolic acid)為兩個主要由椬梧葉子中分得之成分。我們選擇此兩個化合物為HPLC assay之指標成分。實驗結果顯示，熊果酸(ursolic acid)及齊墩果酸(oleanolic acid)豐富的存在於椬梧葉子及根莖中。因此，我們可以藉由此兩個指標成分之分析，進一步控制椬梧藥材之品質。