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而第二篇論文國立臺灣大學 動物科學技術學研究所 邱智賢所指導 莊叡豐的 應用硫代乙醯胺建立肝纖維化齧齒類動物模式與探討水飛薊預防肝纖維化之分子機制 (2008),提出因為有 肝纖維化、水飛薊、硫代乙醯胺的重點而找出了 SHP9500的解答。
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慢性酒精攝取下野生牛樟芝對肝臟保護作用的探討
為了解決SHP9500 的問題,作者康琝毓 這樣論述:
長期飲酒導致酒精性脂肪肝,進而引起肝發炎、肝硬化。在原住民口耳相傳下,認為牛樟芝(Antrodia camphorate, AC)可以解宿醉,改善肝疾病等病症等等的作用,然而市面上牛樟芝多為人工培養對於保護肝臟的效用眾說紛紜,因此本實驗為探討野生牛樟芝在慢性酒精攝取下是否具保護肝臟作用﹖本研究挑選五週齡雄性Wistar大鼠將其分為四組,飲食皆為chow diet,飲水以20%酒精水溶液取代,先飼養一週適應環境,一週後隨機分組成四組,每組十隻大鼠,分組如下:一) ALC組:給予20%酒精水溶液;二) ALC_Sil組:給予20%酒精水溶液+0.25g/kg b.w.劑量的silymarin;三
) ALC_1X組:給予20%酒精水溶液+0.025g/kg b.w.劑量的野生牛樟芝子實體粗萃取物;四) ALC_4X組:給予20%酒精水溶液+0.1g/kg b.w.劑量的野生牛樟芝子實體粗萃取物,持續飼養4週後發現ALC_4X組具有較低的內臟脂肪的重量百分比(p<0.05),野生牛樟芝子實體粗萃取物組別(ALC_1X組,ALC_4X組)有較低血清中TC的濃度(p<0.05),並且有較少的肝臟中脂肪含量以及TC與TAG (只有ALC_4X組)濃度(p<0.05),較高的糞便中TC與膽酸的排泄(p<0.05)。ALC_1X組與ALC_4X組中肝臟破損指數(AST、ALP)也比ALC組低。另外
,野生牛樟芝子實體粗萃取物也可以降低慢性酒精攝取下血清與肝臟中脂質過氧化物(MDA)濃度(p<0.05),提高肝臟中總抗氧化能力(TEAC) (p<0.05),而肝臟中GSH含量只有ALC_Sil組與ALC_4X組顯著增加(p<0.05)。酒精代謝方面:ALC_1X組與ALC_4X組中肝臟中ADH、ALDH的基因表現量上升(p<0.05),另外,野生牛樟芝子實體粗萃取物也可提升ADH (只有ALC_4X組)、ALDH酵素活性(p<0.05),降低血清中酒精濃度(p<0.05)。在代謝酒精的另一條路徑中,雖然0.1g/kg b.w.野生牛樟芝劑量會向下調控肝臟的CYP2E1的基因表現量(p<0.
05),但是也減少其代謝過程中所產生的自由基,降低肝臟氧化壓力。同時,野生牛樟芝子實體粗萃取物也幫助提高肝臟中抗氧化酵素SOD、CAT與GSH-Px的活性(p<0.05),清除體內因代謝酒精產生的過多自由基,降低肝臟受傷機會,而CAT活性的提高也加速酒精的代謝。在體內膽固醇恆定(Cholesterol homeostatsis)相關基因表現:ALC_1X組與ALC_4X組可降低肝臟中HMG-CoAR基因表現(p<0.05)減少內生性膽固醇的合成。在體內脂肪酸與三酸甘油酯(Fatty acid and triacylglycerol)生成相關基因表現:野生牛樟芝子實體粗萃取物可降低肝臟中SREB
P-1c、ACC (只有ALC_4X組)與FAS基因表現(p<0.05)。在能量代謝(Energy metabolism)相關基因表現:ALC_4X組中肝臟中PPAR-α的基因表現量相對提高(p<0.05)。從肝臟切片中觀察慢性飲酒大鼠補充野生牛樟芝子實體粗萃取物可以減少肝臟細胞壞死的病灶與發炎現象產生,同樣在與肝臟發炎相關的基因表現中發現,野生牛樟芝子實體粗萃取物可以降低TNF-α、KLF-6與TGF-β1的基因表現,但是下降的AP-1基因表現只有在0.1g/kg b.w.劑量下發現(p<0.05)。本實驗結果指出:在慢性酒精攝取下,野生牛樟芝子實體粗萃取物具有降低血清總膽固醇濃度、肝受損指
數與肝臟脂肪含量,促進糞便總膽固醇與膽酸的排泄,提高肝臟抗氧化能力,避免酒精氧化造成的傷害;另外,野生牛樟芝子實體粗萃取物則可抑制因慢性酒精攝取下所造成的脂質生成以及發炎相關的基因表現;此外,野生牛樟芝子實體粗萃取物也可相對提升能量代謝相關基因表現,繼而降低肝代謝異常所造成的傷害。
應用硫代乙醯胺建立肝纖維化齧齒類動物模式與探討水飛薊預防肝纖維化之分子機制
為了解決SHP9500 的問題,作者莊叡豐 這樣論述:
肝臟纖維化與肝硬化為慢性肝病,主要由於慢性肝損傷造成,像是酗酒或慢性肝炎等。肝臟損傷會導致傷疤組織在健康的肝臟中累積,若造成肝纖維化或肝硬化的病因持續進行,肝臟最終將會走向肝硬化而使肝臟功能喪失。以往醫學研究認為肝硬化是不可逆的,然而在肝硬化形成初期,即肝纖維化初始時,其病情是仍處於可逆轉的情況。因此,本研究之目的是建立肝纖維化動物模式並找尋可能用來治療或預防肝纖維化的機制。本研究利用硫代乙醯胺(thioacetamide, TAA)以腹腔注射來誘發實驗動物肝臟纖維化。同時評估雄性ICR小鼠、BALB/c小鼠以及Wistar大鼠中哪種實驗動物較適合用於肝纖維化動物模式。初步結果顯示給予每
公斤體重100毫克的TAA,可以誘發明顯的肝臟纖維化,並造成肝重體重比 (1.3-1.5倍)以及使血液中AST (1.6-2.4倍) 與ALT (3-4倍) 的上升。因此,應用TAA可成功的在三種實驗動物誘發肝臟損傷並造成肝纖維化。此外,本研究也比較了雄性與雌性ICR小鼠在誘發肝纖維化因性別所造成的差異,初步結果顯示雄性小鼠作為誘發肝纖維化動物模式為較佳的選擇。為了找尋治療或預防肝纖維化的機制,我們應用此動物模式評估薑黃素 (curcumin)、白藜蘆醇 (resveratrol) 以及水飛薊 (silymarin) 的護肝功效,就先前文獻已知此三種植化素已被證實具有抗發炎、抗氧化以及抗癌等特
性。本試驗初步結果顯示,薑黃素、白藜蘆醇以及水飛薊均有預防肝損傷以及肝纖維化的功效,而水飛薊在本試驗中發現效果較為顯著,並已是現今臨床用藥且具有治療潛力;因此選擇此藥物進行後續肝纖維化預防之分子機制探討,本試驗利用半定量反轉錄聚合酵素連鎖反應分析NF-κB、AP-1以及KLF6等轉錄因子的mRNA量,結果發現TAA的處理可顯著增加此三種轉錄因子的表現,而在TAA與水飛薊共處理組中發現水飛薊處理可以減少AP-1以及KLF6的表現。肝細胞中的KLF6可調控其下游基因TGF-β1表現分泌,並刺激肝臟星狀細胞的活化並使細胞外基質堆積在肝臟中。這些結果顯示水飛薊保護肝臟減緩纖維化的機制可能是經由減少KL
F6轉錄因子的表現,來抑制肝臟星狀細胞的活化以及減少肝臟纖維化的程度。總結以上結果,本試驗已成功建立肝纖維化齧齒類動物模式,並可應用於評估具預防肝纖維化功效之健康食品。而薑黃素、白藜蘆醇以及水飛薊應用於此一動物模式中均有預防肝損傷以及肝纖維化的功效。此外,水飛薊預防肝纖維化的機制可能經由抑制KLF6轉錄因子的表現,進而減少TGF-β1的表現量來抑制星狀細胞的活化並且減少肝臟組織中纖維的堆積。但其調控機制需要更進一步的探討。
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